室間隔缺損通過患者的癥狀和超聲心動圖檢查就可以確診。超聲心動圖檢查是確診室間隔缺損最主要的無創的方法,通過心臟彩超檢查,可以看到患者有沒有室間隔缺損以及評估是哪一種類型的室間隔缺損。另外,還有一些其他的輔助檢查,像是心電圖可以看到有電軸左偏。X線檢查對于一些較重的室間隔缺損可以表現為肺動脈的擴張。心導管的檢查可以看到心臟的左右分流情況,以及肺靜脈循環的壓力。
患者的癥狀根據室間隔缺損類型不同也是不一樣的,但是基本上所有的病人都會有胸骨左緣3~4肋間收縮期的雜音,還伴有震顫,這種情況是確診室間隔缺損一個很重要的依據。對于很嚴重的大型的室間隔缺損,一般很少能存活到成人期,患者在早期就會出現全身發紺,缺氧的情況。