第一,可以做鋇劑灌腸,典型的先天性巨結腸鋇劑灌腸可以清楚顯示狹窄、移行和擴張段,24小時復查腹部平片仍有大量鋇劑滯留。
第二,乙酰膽堿酯酶染色,先天性巨結腸的特征之一就是無神經節細胞長段,復交感神經大量增生,增生的神經纖維位于黏膜固有層和黏膜肌層,出現乙酰膽堿酯酶陽性。
第三,肛門直腸測壓,直腸內氣囊注入大量氣體,沒有直腸肛門抑制反射,新生兒由于肌間神經從發育不成熟,或者剛建立肌反射,尚不穩定,因此慎用。
第四,直腸黏膜吸引活檢,從直腸壁吸引黏膜和黏膜下肌層活檢,肌間神經節細胞缺如即可診斷,對新生兒較為可靠。
第五,直腸全層活檢,理論上為金標準,需要在麻醉下進行。